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本试剂盒采用酶解法裂解病毒样本，利用硅胶膜离心柱对病毒DNA/RNA进行特异性吸附，优化的裂解液可以促进细胞充分裂解、蛋白变性、病毒DNA/RNA释放；优化的吸附缓冲液能有效地促进病毒DNA/RNA结合到硅胶膜上；杂质不与硅胶膜结合，经过两步洗涤去除；最后使用Elution Buffer或RNA-free Water洗脱。

本试剂盒适用于从血浆、血清、全血、组织匀浆液、无细胞体液、鼻咽或口咽抽吸物或洗液、痰液、鼻咽或口咽拭子、培养动物细胞上清中提取病毒DNA/RNA。使用本试剂盒纯化的病毒DNA/RNA可用于PCR、RT-PCR、qPCR、qRT-PCR。

• 样本避免反复冻融。
  
• 所有离心步骤均在室温下进行。
  
• 第一次使用前应按试剂瓶标签说明先向Wash Buffer中加入56mL无水乙醇，并做好标记。
  
• 使用前请将Proteinase K(干粉)溶于Proteinase K贮存液中，配制的Proteinase K Buffer请于-20℃保存。
  
• 为了将膜上的DNA/RNA充分洗脱，实验中应注意将Elution Buffer加至膜中央位置。
  
• 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 样本处理：
  提前准备56℃水浴或金属浴。
  
  • 液体样本处理：
    
    • 加入200μL Lysis Buffer于一无菌的1.5mL EP管中，加入20μL Proteinase K Buffer和1μL Acryl Carrier。
      
    • 在EP管中加入200μL样本，涡旋混匀。
      
      • 如果样品量不足200μL，用PBS或0.9% NaCl补至200μL。
    • 56℃孵育20min。
    • 粘稠液体如痰液:可参考“固体样本的处理”
  • 固体样本(如拭子)的处理：
    
    • 将单个拭子头及其全部保存液放入一个无菌的1.5mL EP管中，并将多余的拭子头杆部剪掉。
      
    • 加入200μL Lysis Buffer，20μL Proteinase K Buffer和1μL Acryl Carrier，涡旋混匀。
      
    • 56℃孵育20min，期间涡旋混匀3～5次。
• 12000rpm离心5min，转移上清至一无菌的EP管中。
  
• 加入200μL无水乙醇，上下颠倒混匀，室温孵育3min。
  
• 将上一步所得溶液全部转入吸附柱，12000rpm离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
  
• 向吸附柱中加入600μL Wash Buffer (使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心30s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
  
• 重复操作步骤5。
  
• 将吸附柱放回收集管中，12000rpm，离心2min，倒掉废液。将吸附柱开盖置于室温放置3～5min，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  
  • 残留的无水乙醇可能会影响得率及后续实验。
• 将吸附柱转入一个干净的1.5mL EP管中，向吸附膜的中央加入40～200μL Elution Buffer或RNA-free Water洗脱，室温放置2min，12000rpm离心1min，将DNA于-20℃保存或将RNA于-70℃保存。
  
  • 将Elution Buffer或RNA-free Water平衡至室温后使用。
    
  • 为增加洗脱病毒DNA/RNA得率，可将离心所得洗脱液再次吸入吸附柱中，室温静置2min，12000rpm，离心1min。